拨号18824625256

你的位置:首页 > 公司新闻 > 酶联免疫法用于标记的酶须知事项

公司新闻

酶联免疫法用于标记的酶须知事项

公司新闻
   酶联免疫法用于标记的酶须知事项

  用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。当前应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用广。

  1、过氧化物酶

  过氧化物酶广泛分布于植物中,辣根中含量高,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40 000,约由300个氨基酸组成,等电点为pH 3-9,催化反应的适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH 5左右。此酶溶于水和50%饱和度以下的硫酸铵溶液。酶蛋白和辅基的大吸收光谱分别为275nm和403nm。

  酶的纯度以RZ表示:RZ=OD403/OD275

  纯酶的RZ多在3.0以上,高为3.4。RZ在0.6以下的酶制品为粗酶,非酶蛋白约占 75%,不能用于标记。RZ在2.5以上者方可用于标记。HRP的作用底物为过氧化氢,催化反应时的供氢体有几种:

  (1)邻苯二胺(OPD),产物为橙色,可溶性,敏感性高,大吸收值在490nm,可用肉眼观察判别,容易被浓H2SO4终止反应,颜色可在数小时内不改变,是目前国内ELISA中常用的一种;

  (2)联大茴香胺(OD),产物为橘黄色,大吸收值在400nm,颜色较稳定;

  (3)5-氨基水杨酸(5-AS):产物为深棕色,大吸收值在449nm,部分溶解,敏感性较差;

  (4)邻联甲苯胺(OT)产物为蓝色,大吸收值在630nm,部分溶解,不稳定,不耐酸,但反应快,颜色明显。

  2、碱性磷酸酶

  系从小牛肠粘膜和大肠杆菌中提取,由多个同功酶组成。它们的底物种类很多,常用者为硝基苯磷酸盐,廉价无毒性。酶解产物呈黄色,可溶,大吸收值在400nm。酶的活性以在pH10反应系统中,37℃1分钟水解1μg磷酸苯二钠为一个单位。

  • 下一篇:没有了

联系我们

地址:深圳市坪山区坑梓街道金沙社区金辉路16—1号B栋601-1 传真: Email:2880189134@qq.com
24小时在线客服,为您服务!

版权所有 © 2020 深圳海思安生物技术有限公司 备案号:粤ICP备18159018号 技术支持:化工仪器网 管理登陆 GoogleSitemap
关键词:PCR实验室场景方案,标准品对照品,药物杂质,抗体抗原,血清,ELISA试剂盒等

在线咨询
QQ客服
QQ:2880189141
电话咨询
0755-89218110
关注微信